最近幾天，“魏則西事件”持續(xù)發(fā)酵，針對(duì)百度、莆田系的聲討一浪高過(guò)一浪。而魏則西采用的DC-CIK療法也歸屬于腫瘤免疫療法，有人聲稱免疫治療”害死了“魏則西，甚至已經(jīng)有人開(kāi)始抵制腫瘤免疫療法。其實(shí)，DC-CIK療法屬于腫瘤免疫療法中的一種，實(shí)際上，任何一種利用患者自身免疫系統(tǒng)殺傷或者抑制腫瘤細(xì)胞的療法都能被稱之為“腫瘤免疫療法”，比如比較熱門的CAR-T療法、PD-1單抗藥物等。

　　那么，腫瘤免疫療法目前的研究狀況究竟如何？腫瘤免疫療法究竟能否幫助人類攻克癌癥？

　　在4月27日上海細(xì)胞治療集團(tuán)總裁錢其軍教授就為大家分享了當(dāng)前免疫治療領(lǐng)域前沿情況。希望大家能夠更為全面的了解腫瘤免疫治療，不要因?yàn)?amp;ldquo;人禍”而讓免疫治療本身成為“躺槍”的對(duì)象。以下為文章正文：

　　免疫細(xì)胞治療開(kāi)始受到全球醫(yī)學(xué)界和科學(xué)界的認(rèn)可

　　十年內(nèi)使60%的腫瘤消退，為什么我們會(huì)提出這樣一個(gè)目標(biāo)。這個(gè)目標(biāo)給很多人的印象似乎不怎么靠譜，是一個(gè)不可能完成的計(jì)劃moomshot計(jì)劃。很多醫(yī)生，甚至一些科學(xué)家都認(rèn)為腫瘤太復(fù)雜了，而且越研究發(fā)現(xiàn)它越復(fù)雜，經(jīng)常會(huì)看到癌癥的細(xì)胞，以百計(jì)、千計(jì)乃至萬(wàn)計(jì)的基因發(fā)生突變。在同一種癌癥，甚至同一個(gè)病人的不同癌癥細(xì)胞中，基因突變也會(huì)有很大的不同。往往，一個(gè)癌癥病人可能會(huì)有幾個(gè)甚至幾十個(gè)癌癥起始基因或者說(shuō)癌癥關(guān)鍵基因，這么復(fù)雜的基因突變與相互關(guān)系，讓很多科學(xué)家及醫(yī)生都悲觀地認(rèn)為自已這輩子肯定是看不到癌癥被治愈的時(shí)刻，甚至我們的下一輩也看不到癌癥被治愈的希望。

　　可喜的是，免疫細(xì)胞醫(yī)學(xué)的高速發(fā)展，為我們換一種思維來(lái)思考這個(gè)問(wèn)題帶來(lái)契機(jī)——其實(shí)我們并不需要去了解是什么原因或基因引起了癌癥，我們只需要知道癌癥細(xì)胞與正常細(xì)胞的差異，并能夠使免疫細(xì)胞對(duì)這種差異發(fā)起攻擊就可以了。

　　現(xiàn)在，研究癌癥細(xì)胞與正常細(xì)胞的差異就比較簡(jiǎn)單了，通過(guò)二代基因測(cè)序?qū)Χ哌M(jìn)行全外顯子及全轉(zhuǎn)錄子組測(cè)序，就能找到癌癥細(xì)胞突變產(chǎn)生的新抗原，甚至知道哪一個(gè)是旗幟新抗原，即最早期的一些突變引起新抗原，這些突變可能在所有的癌細(xì)胞里都是存在的，但是在正常的細(xì)胞中是不存在的，這就是癌癥的特異性抗原。我們也通過(guò)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序，發(fā)現(xiàn)癌癥細(xì)胞表達(dá)比較高，而正常細(xì)胞表達(dá)非常低或者幾乎沒(méi)有癌癥的相關(guān)抗原。

　　試想，如果針對(duì)這些新抗原發(fā)起有效免疫攻擊，就有可能治愈癌癥。在血液腫瘤中，由于是流動(dòng)的，相對(duì)而言免疫抑制及營(yíng)養(yǎng)抑制比較低，這種治療方法會(huì)非常有效。而實(shí)體瘤（即癌癥）中，要使癌癥組織從免疫抑制變成免疫戰(zhàn)場(chǎng)并非是一件容易的事，需要克服免疫抑制及營(yíng)養(yǎng)抑制癌癥局部微環(huán)境，才可能成為免疫的“戰(zhàn)場(chǎng)”。如能克服這些，免疫治療完全有可能治愈癌癥。

　　最近，不少美國(guó)科學(xué)家樂(lè)觀地認(rèn)為未來(lái)十年60%-90%的癌癥將有可能被治愈，我們提出未來(lái)十年60%癌癥將消退，這應(yīng)是一個(gè)相對(duì)保守的目標(biāo)。因?yàn)?，未?lái)十年會(huì)發(fā)生很多變化，免疫治療也在日新月異地發(fā)生變化，我們真還不知道未來(lái)十年會(huì)發(fā)展到什么程度。

　　長(zhǎng)期以來(lái)，免疫治療的概念一直被廣泛看好，但臨床療效一直不太理想。所以，免疫治療一直在是夢(mèng)想還是騙局中徘徊，直至2013年，不少的臨床結(jié)果均顯示其療效明顯，才得到廣泛認(rèn)可。

　　嚴(yán)格來(lái)講，2015年是免疫治療元年，越來(lái)越多的醫(yī)生及科學(xué)家開(kāi)始認(rèn)可免疫治療領(lǐng)域。這里，我發(fā)幾張圖片讓大家來(lái)看看，現(xiàn)在癌癥免疫治療到底有多熱。

　　三把利劍，將為我國(guó)癌癥患者帶來(lái)福音

　　目前，全球癌癥免疫治療主要包括以下三個(gè)方面：1.針對(duì)新抗原的特異性T細(xì)胞治療；2.以基因修飾為核心的CAR-T、TCR-T免疫細(xì)胞治療；3.免疫檢查點(diǎn)抗體治療。這三個(gè)方面，越往后越朝著研發(fā)制藥的方向發(fā)展，越往前更像一種醫(yī)療技術(shù)。

　　我們先從關(guān)注度最高的免疫檢查點(diǎn)抗體開(kāi)始講起，它的理論基礎(chǔ)是腫瘤組織周圍存在著針對(duì)癌細(xì)胞的特異性T細(xì)胞，只是因?yàn)樵诿庖咭种频那闆r下不能發(fā)揮作用，所以只要一旦解決了這種抑制狀態(tài)，就能達(dá)到治愈腫瘤的目的。因此，針對(duì)PD-1、PD-L1、CTLA-4、TIM3及LAG3等抗體被廣泛用于研究及臨床實(shí)驗(yàn)，當(dāng)然最多是針對(duì)PD-1、PD-L1及CTLA-4的抗體。在國(guó)際上，已經(jīng)開(kāi)展了大量臨床試驗(yàn)，針對(duì)PD1及CTLA-4的抗體已被批準(zhǔn)上市。

　　國(guó)內(nèi)已有多家公司開(kāi)展這方面的研究，如恒瑞、信達(dá)、君實(shí)、百濟(jì)神州、嘉和生物等，它們已被批準(zhǔn)進(jìn)入臨床試驗(yàn)或即將被批準(zhǔn)進(jìn)行臨床試驗(yàn)。但是這種抗體治療有兩個(gè)問(wèn)題：（1）價(jià)格昂貴，PD-1是15萬(wàn)美元/年，中國(guó)的老百姓是否能用得起？（2）更大問(wèn)題是，這種治療方法是犧牲全身免疫平衡，來(lái)?yè)Q取解除腫瘤局部免疫抑制。本來(lái)對(duì)一個(gè)病人而言，最好是在癌癥局部徹底解除免疫抑制，越徹底越好。最好是針對(duì)PD-1、PD-L1、CTLA-4、TIM3及LAG3抗體及IDO抑制劑一起，使腫瘤局部成為免疫戰(zhàn)場(chǎng)，猶如把腫瘤微環(huán)境變成移植物排斥反應(yīng)一樣，這當(dāng)然可能可以鏟除非常大的腫瘤，如新英格蘭雜志發(fā)表的文章，PD1聯(lián)合CTLA-4抗體聯(lián)用，可以使碗口大的腫瘤在三周內(nèi)消失。（見(jiàn)圖）

　　但這種多種免疫檢查點(diǎn)抗體一起使用，可能會(huì)帶來(lái)全身免疫平衡被打破，如導(dǎo)致間質(zhì)性肺炎、急性肝損傷，甚至導(dǎo)致死亡。因此，最好的辦法是局部改變腫瘤微環(huán)境就可以，不要影響全身平衡。為此，我們應(yīng)用能有效趨化到腫瘤組織的特異性T細(xì)胞，如腫瘤浸潤(rùn)T細(xì)胞(TIL）、外周血中分離PD1或CD137陽(yáng)性的T細(xì)胞或者通過(guò)DC來(lái)誘導(dǎo)特異性T細(xì)胞來(lái)表達(dá)PD-1、CTLA-4等抗體，由于這種T細(xì)胞能夠很快到腫瘤位置去，在腫瘤局部高水平表達(dá)這些抗體。從理論上講，它既能解除腫瘤局部免疫抑制狀態(tài)，又在腫瘤局部輸入了大量腫瘤特異性T細(xì)胞，這種治療方法猶如武俠小說(shuō)中的“倚天劍”，既有細(xì)胞殺傷又有抗體作用，療效應(yīng)該會(huì)大幅度提高，且副作用比較小，而且可以表達(dá)多種抗體，這種方案應(yīng)比國(guó)際上用CRISPR/Cas9將PD1基因敲除更加有效，T細(xì)胞分泌的PD1抗體不僅作用自己免疫細(xì)胞，還能喚起腫瘤組織內(nèi)的免疫細(xì)胞，從而產(chǎn)生群集效應(yīng)。這種優(yōu)勢(shì)大家一聽(tīng)就明白，但問(wèn)題是T細(xì)胞要表達(dá)高濃度的抗體是一件非常不容易的事情。要使抗體達(dá)到治療濃度幾乎不可能，我們經(jīng)過(guò)多年的探索，也申請(qǐng)了大量專利技術(shù)，采用了非病毒載體轉(zhuǎn)座子技術(shù)，能夠在多個(gè)位點(diǎn)上整合，使抗體表達(dá)水平達(dá)到產(chǎn)生療效的濃度，并已經(jīng)開(kāi)始進(jìn)行臨床試驗(yàn)，希望通過(guò)局部表達(dá)多種免疫檢查點(diǎn)抗體，使腫瘤局部成為免疫戰(zhàn)場(chǎng)。

　　第二個(gè)來(lái)講CAR-T及TCR-T，這個(gè)領(lǐng)域國(guó)際上非常熱，但主要是在血液腫瘤，療效也非常好。在急性B淋巴細(xì)胞白血病中，對(duì)于所有治療都無(wú)效的病人仍有90-94%的療效，在淋巴癌中有80%的有效率，從而引起廣泛的關(guān)注。

　　國(guó)內(nèi)也有很多公司或醫(yī)院也在研發(fā)這種技術(shù)，國(guó)內(nèi)除了做血液病治療也用于很多實(shí)體瘤治療。

　　下面我把CAR-T技術(shù)分解一下：CAR-T包括

　?。?）靶點(diǎn)，這方面專利多數(shù)己過(guò)期，所以大家都可以研發(fā)了；

　?。?）與靶點(diǎn)結(jié)合的單鏈抗體，由于這單鏈抗體結(jié)合力不要太高，只要5×10-8-5×10-9就可以了，要尋找到這樣的單鏈抗體并不算太難，只要有一定規(guī)模的公司或研究機(jī)構(gòu)就可以在抗體庫(kù)中尋找到這些靶點(diǎn)的單鏈抗體，目前很多中國(guó)公司或研究機(jī)構(gòu)都會(huì)有申請(qǐng)或擁有這樣的抗體專利，這也是很多中國(guó)公司或研究機(jī)構(gòu)聲稱擁了多項(xiàng)CAR-T專利的核心；

　　（3）跨膜區(qū)與胞內(nèi)區(qū)，所有CAR-T的差別不大，這些都是美國(guó)的專利，中國(guó)的公司及研究機(jī)制很難繞得過(guò)這些專利；

　?。?）剎車及安全開(kāi)關(guān)，HSV-TK、iCaspase9、靶向雙陽(yáng)性細(xì)胞的雙CAR、分別靶向腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞的雙CAR系統(tǒng)：CAR+iCAR、應(yīng)用小分子將CAR-T激活元件與CID融合表達(dá)實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)調(diào)控CAR-T系統(tǒng)，這幾種方法各有優(yōu)劣性，我們?cè)谶@方面有兩個(gè)專利，將抗體結(jié)合小肽放入單鏈抗體中作為開(kāi)關(guān)，另外，我們很早就申請(qǐng)了將二條信號(hào)分開(kāi)的雙CAR專利。

　?。?）轉(zhuǎn)染技術(shù)，國(guó)際上常用的慢病毒載體系統(tǒng)，實(shí)驗(yàn)室規(guī)模(即用于幾十例病人規(guī)模)難度并不大，但要進(jìn)行大規(guī)模臨床應(yīng)用時(shí)會(huì)有一定難度，我們采用自主研發(fā)的非病毒載體特殊的轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)，我們系統(tǒng)的轉(zhuǎn)染率及表達(dá)量都高于慢病毒載體系統(tǒng)，非常容易質(zhì)量控制及規(guī)模化生產(chǎn)，更為重要的是我們系統(tǒng)包含基因的容量大大高于慢病毒載體，因此一次同時(shí)插入多個(gè)CAR及其他基因。

　　目前國(guó)內(nèi)的CAR-T做得非常熱鬧及繁榮，會(huì)產(chǎn)生一些療效，也受得資本市場(chǎng)的熱捧。目前CAR-T多采用在美國(guó)第二代CAR-T基礎(chǔ)進(jìn)行仿制，無(wú)論講的是第三代或者第四代，其核心問(wèn)題都無(wú)法繞過(guò)第二代CAR-T的專利。由于CAR-T技術(shù)比較簡(jiǎn)單，并沒(méi)有超過(guò)CIK技術(shù)難度多少，只要有一定規(guī)模的公司或研究機(jī)構(gòu)都可以很快地完成多個(gè)CAR-T的研發(fā)。如果國(guó)家對(duì)于這個(gè)領(lǐng)域不進(jìn)行管控，相信未來(lái)會(huì)有幾百家甚至上千家創(chuàng)新型企業(yè)聲稱擁有CAR-T專利技術(shù)，這些專利技術(shù)多數(shù)應(yīng)是結(jié)合各種靶點(diǎn)的獨(dú)特單鏈抗體而形成的CAR-T。然而，無(wú)論在中國(guó)CAR-T多么熱鬧，但是一經(jīng)形成規(guī)模產(chǎn)品，必然面臨需要美國(guó)第二代CAR-T的專利的授權(quán)及大規(guī)模臨床應(yīng)用轉(zhuǎn)染系統(tǒng)如慢病毒載體臨床級(jí)的生產(chǎn)技術(shù)，這是一個(gè)被別人卡住脖子的研發(fā)，風(fēng)險(xiǎn)比較大。我們正在開(kāi)發(fā)能完全繞過(guò)第二代CAR-T技術(shù)的產(chǎn)品，這種技術(shù)的療效將明顯優(yōu)于CAR-T技術(shù)，希望在今年底應(yīng)用于臨床。CAR-T好像“玄鐵劍”一樣療效顯著，但也有可能出現(xiàn)細(xì)胞因子風(fēng)暴或誤殺正常細(xì)胞，必須要很好的控制，我們新一代技術(shù)應(yīng)可以非常好的實(shí)現(xiàn)。

　　精準(zhǔn)新抗原的T細(xì)胞，這種非轉(zhuǎn)基因的T細(xì)胞也有一定的前景，我們與周向軍教授的源正細(xì)胞研究得比較多。這種技術(shù)單獨(dú)應(yīng)用，只能在殘留腫瘤細(xì)胞才會(huì)比較有效，如手術(shù)后防復(fù)發(fā)。對(duì)于廣泛轉(zhuǎn)移的腫瘤治療，它需要聯(lián)合放、化療或免疫檢查點(diǎn)抗體才能產(chǎn)生療效。這種技術(shù)猶如“六脈神劍”，非常準(zhǔn)確打擊穴位，六脈神劍需要非常強(qiáng)的內(nèi)力，也就是需要激活T細(xì)胞的能力非常強(qiáng)，我們的新型小分子誘導(dǎo)DC成熟明顯高于國(guó)際上常規(guī)誘導(dǎo)方案，使T細(xì)胞活化能力大幅度增強(qiáng)。

　　目前，我們上海細(xì)胞治療集團(tuán)是正在研究“三劍合一”的“白澤劍”。

　　我們的中短期目標(biāo)是以療效為目的的整合國(guó)際上的優(yōu)勢(shì)技術(shù)，并進(jìn)行多個(gè)技術(shù)改進(jìn)，這就是“白澤劍”：

　　（1）我們新一代CAR-T；

　　（2）表達(dá)免疫檢查點(diǎn)抗體PD1、PDL1、CTLA4、TIM3等；

　　（3）精準(zhǔn)免疫細(xì)胞的TCR及趨化因子受體，能趨化到腫瘤位置，并能進(jìn)入腫瘤內(nèi)部；

　?。?）能高水平表達(dá)、高效轉(zhuǎn)染的非病毒載體特殊的轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)，希望能使60%的腫瘤消褪。

　　我們的長(zhǎng)期目標(biāo)是尋找到完全創(chuàng)新的靶點(diǎn)及技術(shù)，簡(jiǎn)單而言，建立多個(gè)免疫細(xì)胞治療非常有效的病人治療前后Fab庫(kù)，通過(guò)基因測(cè)序?qū)ふ业教禺愋缘腇ab文庫(kù)及作用靶點(diǎn)等。

　　我們上海細(xì)胞治療集團(tuán)以技術(shù)突破為核心的創(chuàng)新模式，正在形成核心專利及專利家族是企業(yè)的核保護(hù)傘。

　　細(xì)胞免疫治療臨床案例分享

　　最后，跟大家分享一下我們最近的兩個(gè)臨床案例：

　　案例1：患者4年前行宮頸癌根治術(shù)，術(shù)后病理提示中分化鱗狀細(xì)胞癌，浸潤(rùn)至外膜，累積陰道穹隆，累積神經(jīng)，見(jiàn)脈管癌栓，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移24/51，3年前出現(xiàn)復(fù)發(fā)，術(shù)后行多次放化療，效果不佳，2015-11-26胸部CT提示：兩肺多發(fā)、縱膈、左肺門、左鎖骨上，兩側(cè)腋下多發(fā)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。一般情況較差，PS評(píng)分3分，疼痛評(píng)分6分。

　　2016-01-21行CAT-T細(xì)胞治療；2016-03-12行第二次CAR-T細(xì)胞治療?；剌敽蟪霈F(xiàn)一過(guò)性寒顫、高熱，體溫最高39度，體溫持續(xù)30分后逐步下降至正常，余無(wú)明顯不適。未經(jīng)其它任何抗腫瘤治療。目前情況，經(jīng)過(guò)CAT-T細(xì)胞治療后，患者一般情況改善，腫瘤指標(biāo)恢復(fù)正常，腫瘤明顯縮小，疼痛顯著減輕，目前PS評(píng)分1分，疼痛評(píng)分1分

　　案例2：患者2015年8月1日發(fā)現(xiàn)右肝實(shí)性占位（6X5cm）伴有門靜脈栓子，2015-8-10先行門靜脈右支栓塞術(shù)，并2015-9-10日行右半肝切除術(shù)，術(shù)后病理提示：肝細(xì)胞癌，粗梁型，III級(jí)。術(shù)后繼續(xù)行抗病毒治療，但患者很快出現(xiàn)復(fù)發(fā)，2015-11-19行肝臟MRI提示：肝內(nèi)多發(fā)轉(zhuǎn)移。

　　2015-10-21行精準(zhǔn)T細(xì)胞+PD1治療，回輸后患者出現(xiàn)寒顫、高熱，術(shù)后1月患者出現(xiàn)膽紅素、轉(zhuǎn)氨酶明顯增高，總膽紅素最高138umol/ml，給于對(duì)癥處理后恢復(fù)正常，未經(jīng)任何其它抗腫瘤治療。目前情況，患者腫瘤指標(biāo)CA199恢復(fù)正常，肝內(nèi)轉(zhuǎn)移瘤消失。